主要抑制二氢叶酸还原酶而使二氢叶酸不能还原成有生理活性的四氢叶酸，使嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸的生物合成过程中一碳基团的转移作用受阻，导致DNA的生物合成受到抑制。

结构和磺胺类相似。