鲁米诺与氢氧化物反应时生成了一个双负离子（Dianion），它可被过氧化氢分解出的氧气氧化，产物为一个有机过氧化物。

该过氧化物很不稳定，立即分解出氮气，生成激发态的3-氨基邻苯二甲酸。

激发态至基态转化中，释放的能量以光子的形式存在，波长位于可见光的蓝光部分。

在检验血痕时，鲁米诺与血红素（hemoglobin，血红蛋白中负责运输氧的一种蛋白质）发生反应，显出蓝绿色的荧光。

鲁米诺的灵敏度可以达到一百万分之一。

即1滴血混在 999，999滴水中时也可以被检验出来。

不过它与其他具有氧化性的物质也发生反应，但是显示的颜色和显色的时间长短都是不同的。