底物水平磷酸化（substrate level phosphorylation）：物质在生物氧化过程中，常生成一些含有高能键的化合物，而这些化合物可直接偶联ATP或GTP的合成，这种产生ATP等高能分子的方式称为底物水平磷酸化。

如甘油酸-2-磷酸脱水生成烯醇丙酮酸磷酸时，也能在分子内部形成一个高能磷酸基团，然后再转移到ADP生成ATP。

又如在三羧酸循环中，琥珀酰CoA（辅酶A）生成琥珀酸，同时伴有GTP的生成，也是底物水平磷酸化。

扩展资料特点底物水平磷酸化指高能化合物的放能水解作用或与基团转移相偶联的ATP合成作用。

不包括光合磷酸化或呼吸链中氧化磷酸化的ATP生成过程。

例如：糖酵解途径中产生的高能磷酸化合物甘油酸-1，3-二磷酸和烯醇式磷酸丙酮酸在酶的作用下，高能磷酸基团转移到ADP分子上生成ATP。

例如在糖的分解代谢过程中，甘油醛-3-磷酸脱氢并磷酸化生成甘油酸-1，3-二磷酸，在分子中形成一个高能磷酸基团，在酶的催化下，甘油酸-1，3-二磷酸可将高能磷酸基团转给ADP，生成甘油酸-3-磷酸与ATP。

参考资料来源：百度百科-底物水平磷酸化。